轉(zhuǎn)化成乙醇酸的試驗法
有機化合物內(nèi)的NH2基團,可因該化合物和亞硝酸一起溫熱而與OH基團交換。因此可從氨基醋酸來形成羥基醋酸(乙醇酸):
CH2NH2COOH+HNO2 → CH2OHCOOH+H2O+N2 (1)
乙醇酸如和濃硫酸緩和地加熱,會引起分裂而形成甲醛:
CH2OHCOOH → CH2O+CO+H2O (2)
由于甲醛和濃硫酸及鉻變酸會產(chǎn)生紫色,如將反應(yīng)(2)于有鉻變酸存在下進行,這個顯色反應(yīng)就會發(fā)生。所以如將甘氨酸轉(zhuǎn)化成乙醇酸,如反應(yīng)(1)所示,就可利用甲醛-鉻變酸反應(yīng)來作出檢定。
其它氨基酸類,對這試驗并無干擾,因為只有甘氨酸可被轉(zhuǎn)化成乙醇酸。
這里所述的試驗法,在有能產(chǎn)生甲醛的化合物,如六甲撐四胺及其鹽類或次硫酸鹽等存在時,都不適用。
操作手續(xù) 試驗在微量試管中進行。試液一滴與1%亞硝酸鈉溶液及濃鹽酸各一滴混和?;旌衔镌谧杂苫鹧嫔霞訜嶂练衅?。在105~110°蒸發(fā)后,將殘渣冷卻,而用新配的試劑2~3滴處理。混合物放沸水浴中保持5~10分鐘。如現(xiàn)紫色即示明有甘氨酸存在。
試劑:將鉻變酸在濃硫酸中的懸浮體緩和地加熱并進行離心分離。其上層的清液可用作試劑。
鑒定限度:10微克 氨基醋酸
降解成甲醛的試驗法
α-氨基酸類如用堿金屬次鹵酸鹽處理,就會脫去羧基及氨基而形成醛類,其中所含碳原子的數(shù)目比原來氨基酸中少了一個。在甘氨酸(α-丙氨酸與酪氨酸也可被氯胺T降解成醛類,其中碳原子的數(shù)目比其原來的化合物也少了一個)的事例中,變成甲醛的降解是易用氯胺T來達到的。這個次氯酸鹽衍生物的利用,具有減輕甲醛(可用鉻變酸試驗法進行檢定)發(fā)生氧化的優(yōu)點。
下面所述的試驗,在氨基酸這一族中,對于甘氨酸是有特效性的。用鉻變酸處理時能分裂出CH2O的化合物必不可存在,或在事前先予破壞。
操作手續(xù) 在一微量試管中,將0.5%氯胺T新配成的水溶液一滴加到試液一滴中,再將混合物放熱水浴中溫熱3~5分鐘。冷卻后,加入濃硫酸5滴及極小量的固體鉻變酸。紫色立即或在水浴中加熱短時后出現(xiàn),都示正反應(yīng)。
鑒定限度:3微克 甘氨酸