用對-羥基聯苯和硫酸檢測乳酸的試驗法
乳酸和濃硫酸一起溫和地溫熱,就會分解成乙醛和甲酸;甲酸立即分裂:
CH3CH(OH)COOH → CH3CHO+HCOOH(→ H2O+CO)
乙醛和對-羥基聯苯(Ⅰ)反應,可能由于在OH基團的鄰部位上發(fā)生縮合,而形成二-(對-羥基聯苯基)乙烷(Ⅱ):
.jpg)
在硫酸溶液中,(Ⅱ)會緩緩地氧化成未知結構的紫色產物。所以現在的試驗法和利用2,7-二羥萘檢定乙醇酸相似,也牽涉到醛-酚反應,其中濃硫酸作用為縮合劑與氧化劑。事實上,介(乙)醛(四聚乙醛)、仲(乙)醛(三聚乙醛)、丁間醇醛及丙醛和對-羥基聯苯與硫酸反應,都和乙醛類似,會產生深紫色產物。對-羥基聯苯和甲醛成藍-綠色,和丁醛成紅色,和庚醛成橙色。所以α-羥基丁酸和丙酮酸,都發(fā)生與乳酸同樣的顯色反應。
操作手續(xù) 試液一滴和濃硫酸1毫升放入一干試管中,置于水浴內,在85°加熱2分鐘。放在自來水龍頭下冷卻至28°后,加入固體對-羥基聯苯一撮,再將混合物攪拌數次,放置10至30分鐘,將會逐漸出現紫色。過了一些時其色加深。
鑒定限度:1.5微克 乳酸
.jpg)
用鄰-羥基聯苯和硫酸檢測乳酸的試驗法
乳酸和濃硫酸一起加熱所形成的乙醛,也可由其和鄰-羥基聯苯所發(fā)生的藍色螢光來作出檢定。甲醛、介(乙)醛、仲(乙)醛、及其次醛系高級同系物的性行,都類似乙醛。丙酮酸不發(fā)生干擾。螢光反應的化學根據尚未知道。
操作手續(xù) 試液一滴與結晶鄰-羥基聯苯一粒及濃硫酸0.5~1毫升在一試管中混和,置水溶中,在85℃加熱2分鐘。然后將試管對著黑紙檢視其藍色螢光。
鑒定限度:1微克 乳酸
用間-萘二酚和硫酸檢測甘油酸的試驗法
甘油酸(Ⅰ)的水溶液和含少許溶解間-萘二酚(Ⅱ)的濃硫酸共熱,呈現強度的藍色。
這個顯色反應的化學原理尙未明了,可能視同乙醇酸及乳酸的醛-酚反應。其酯類的性行與單體醇酸相似。
乙醇酸及甘氨酸在這個反應中產生棕色;乳酸、α-羥基丁酸、β-羥基丁酸、赤酮酸(三羥基丁酸)、葡糖酸、乙醛酸、丙酮酸、乙酰丙酸、蘋果酸、糖質酸、檸檬酸、中草酸及二羥基酒石酸在試驗條件下都無反應。丙醇二酸及奎尼酸產生綠色;葡糖醛酸產生黃的顏色與綠色的螢光;酒石酸綠到藍綠色;蘋果酸黃的顏色與藍色的螢光。
操作手續(xù) 試液一滴與試劑溶液0.75毫升混和,并在90℃水浴中加熱30至50分鐘,將有藍色出現;藍色的深淺,視甘油酸存在量而定。
試劑:間-萘二酚0.01克溶于96%硫酸100毫升中。
鑒定限度:10微克 甘油酸