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       加熱至160°能產(chǎn)生氨的含氮化合物與草酸二甲酯（熔點(diǎn)54°；沸點(diǎn)163．3°）混和后，如加熱至上述溫度，將會(huì)產(chǎn)生草酰胺：

草酰胺在和硫代巴比土酸干熱時(shí)，會(huì)有深紅色產(chǎn)物形成；通過(guò)這一反應(yīng)，可對(duì)草酰胺作出幾乎特效的檢定?；前粪奏?huì)有干擾。如上反應(yīng)式所列，草酰胺的形成與有色物質(zhì)的產(chǎn)生，可在一次操作中完成，這樣，就可允許對(duì)熱解時(shí)能產(chǎn)生氨的化合物得出檢定。

       這一范疇的化合物包括著：（1）脂族伯和仲胺類(lèi)，（2）氨基酸類(lèi)，（3）有機(jī)酸的銨鹽類(lèi)，（4）脂族羧酸的酰胺類(lèi)，（5）脲及其含自由NH₂－基的衍生物，（6）胍及其含自由NH₂－基的衍生物。
       應(yīng)注意到，揮發(fā)無(wú)機(jī)酸的銨鹽，如和草酸二甲酯與硫代巴比土酸加熱到160°，也會(huì)發(fā)生草酰胺反應(yīng)。因此，脂族伯、仲胺類(lèi)的鹽酸鹽及硝酸鹽，也會(huì)給出正反應(yīng)。
       操作手續(xù)    這個(gè)試驗(yàn)在微量試管中進(jìn)行。將少許固體或其溶液的蒸發(fā)殘?jiān)?，用?shù)厘克草酸二甲酯和硫代巴比土酸處理，并放在130～160°的甘油浴中加熱。1～3分鐘內(nèi)如有紅色產(chǎn)物形成，即示正反應(yīng)。
       根據(jù)這個(gè)試驗(yàn)的靈敏度所示，可以說(shuō)下列氨－給予體（草酰胺的生成者）的數(shù)量，已可檢出：

       這個(gè)操作手續(xù)，曾檢出約0．5毫克的下列各物：芐胺、磷酸精脒、磷酸精胺、鹽酸乙（撐）二胺、α－丙氨酸、l－天冬酰胺、l－組氨酸、丙烯酰胺、扁桃酰胺、煙酰胺、壬二酰二胺、脲、乙酰脲、甲脲、烯丙基脲、苯脲、不對(duì)稱(chēng)－二苯脲、縮二脲、胍、二苯胍、苯胍、對(duì)稱(chēng)－三苯胍^①、1－苯胺基脲（170°）、鹽酸氨基脲。

    ① 這個(gè)化合物按其對(duì)稱(chēng)的化學(xué)式，應(yīng)無(wú)應(yīng)應(yīng)。必須假定它或許有下列的平衡：