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 溶菌酶

中文名稱    溶菌酶

中文同名    脆壁質(zhì)酶，溶菌酶,雞蛋白

英文名稱    lysozyme from human neutrophils

化學(xué)式       C125H1961N40O36S2

分子量       2899.27

CAS編號(hào)   12650-88-3

質(zhì)檢信息

質(zhì)檢項(xiàng)目      指標(biāo)值

含量，%       ≥40000U/mg

PSA：         1406.02000

LOGP：      14.96760

密度  1.725 g/cm3

沸點(diǎn)  400.5°C at 760 mmHg

熔點(diǎn)  185-187?°C(lit.)

閃點(diǎn)  210.1°C

折射率 -180 ° (C=1, H2O)

蒸氣壓 4.45E-08mmHg at 25°C

水溶性 18 g/100 mL (20 oC)

化學(xué)特性

溶菌酶,雞蛋白用作白色或微白色凍干粉,溶于水，不溶于乙醚和丙酮。酸性介質(zhì)中可穩(wěn)定存在，堿性介質(zhì)中易失活。

產(chǎn)品用途

1.溶菌酶,雞蛋白用于生化研究，臨床上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。 

2.生化研究。是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過(guò)破壞細(xì)胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵，使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。溶菌酶還可與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接結(jié)合，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復(fù)鹽，使病毒失活?？煞纸馊鼙谖⑶蚓?、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽(yáng)性菌。

3.要用于五官科多種粘膜炎癥如副鼻竇炎、慢性鼻炎、急慢性咽喉炎、扁平苔癬、口腔潰瘍、滲出性中耳炎，以及皮膚科如帶狀皰疹、扁平疣、水痘等，亦用于哮喘性氣管炎、潰瘍性結(jié)腸炎、腮腺炎等。本品與抗菌藥物同用效果更好。

4.溶菌酶具有破壞細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的功能，用溶菌酶處理G+細(xì)菌可以在破壞細(xì)胞壁后得到原生質(zhì)體，所以廣泛用于生物技術(shù)中，成為基因工程、細(xì)胞工程中細(xì)胞融合操作必不可少的工具酶。

5.針對(duì)溶菌酶無(wú)毒、無(wú)害的特性，同時(shí)對(duì)G+細(xì)胞壁的分解作用，應(yīng)用于水產(chǎn)品和肉類制品中，在保證食品原有營(yíng)養(yǎng)成分不受損失的前提下，可以對(duì)水產(chǎn)品和肉類制品起到保鮮和防腐作用；利用溶菌酶與氯化鈉和亞硝酸鹽聯(lián)合應(yīng)用，可以延長(zhǎng)肉制品的保質(zhì)期，其防腐效果比單獨(dú)使用時(shí)效果更好；試驗(yàn)用0.05%的溶菌酶與植酸聚合磷酸鹽、甘氨酸等配合使用，作為防腐劑和保鮮劑可以對(duì)海產(chǎn)品和水產(chǎn)品延長(zhǎng)儲(chǔ)存期。

6.奶油蛋糕是容易腐敗變質(zhì)的食品之一，在糕點(diǎn)中加入溶菌酶，可防止微生物引起的腐敗變質(zhì)現(xiàn)象發(fā)生；將溶菌酶應(yīng)用于食物的保鮮中，其效果也極為明顯。同時(shí)根據(jù)溶菌酶無(wú)毒、無(wú)害且有保健作用，有抗感染和增強(qiáng)抗生素的效力，以及促進(jìn)血液凝固及止血和組織再生作用，現(xiàn)在有人嘗試在食品中作為添加劑增強(qiáng)食物的保健功效。

 

儲(chǔ)藏措施

1.儲(chǔ)存于陰涼、通風(fēng)的庫(kù)房。

2.應(yīng)與氧化劑、食用化學(xué)品分開(kāi)存放，切忌混儲(chǔ)。

3.保持容器密封。

4.遠(yuǎn)離火種、熱源，防止陽(yáng)光直射。

5.庫(kù)房必須安裝避雷設(shè)備。

6.排風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)設(shè)有導(dǎo)除靜電的接地裝置。

7.采用防爆型照明、通風(fēng)設(shè)置。

8.禁止使用易產(chǎn)生火花的設(shè)備和工具。

9.儲(chǔ)區(qū)應(yīng)備有泄漏應(yīng)急處理設(shè)備和合適的收容材料。

10.防止粉塵和氣溶膠生成。

急救措施 

【食入】攝入不可能。但是，如果攝入，獲得緊急醫(yī)療照顧。

【吸入】如果克服被曝光，將受害人轉(zhuǎn)移到空氣新鮮處。給予吸氧或人工呼吸。獲得緊急醫(yī)療照顧。迅速采取行動(dòng)是至關(guān)重要的。

【皮膚】立即脫去污染的衣著。徹底清洗皮膚，用溫和的肥皂/水。W /溫水沖洗15分鐘。如果是粘的，首先使用無(wú)水清潔。尋求醫(yī)療照顧，如果不良影響或刺激。

【眼睛】眼睛接觸的情況下，立即用清水沖洗20-30分鐘。經(jīng)常收回眼皮。獲得緊急醫(yī)療照顧。

生產(chǎn)方法

一、以蛋清為原料，在pH6.5條件下用弱酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂732吸附后，再用硫酸銨洗脫，經(jīng)透析后冷凍干燥得產(chǎn)品。

二、本發(fā)明的上述技術(shù)目的是通過(guò)以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：一種溶菌酶制劑，包括溶酶菌A試劑，所述溶酶菌A試劑中有效成分為溶菌酶提純液與硅油在高速攪拌下形成的溶酶菌-殼聚糖-硅油。

作為優(yōu)選，還包括以下組分，以下組分按照重量計(jì)：

作為優(yōu)選，所述溶酶菌-殼聚糖-硅油的制備方法主要包括以下步驟：

步驟1，蛋液分離：去除蛋黃，去除雜質(zhì)；

步驟2，預(yù)備液制備，將二氧化硅作為制孔劑，混入高分子殼聚糖中，制備得到殼聚糖多孔膜：將殼聚糖溶解在低濃度的乙酸溶液中形成殼聚糖-乙酸溶液，將殼聚糖-乙酸溶液逐滴添加至液體石蠟中，滴加過(guò)程中持續(xù)攪拌，滴加完畢后高速攪拌至乳化；將低濃度戊二醛溶液與堿性二氧化硅混合并逐滴滴加至混合溶液中，攪拌至完全混合后，離心過(guò)濾5-8min，去除上層清液，將下層淡黃色沉淀收集，多次洗滌得到純凈物后，凍干研磨成粉；

步驟3：將預(yù)備液體與步驟1中制備的蛋液在微酸性環(huán)境下混合，靜置24-48h后，離心8-15分鐘后去除上層清液取下層沉淀；

步驟4：將鹵代硅烷與有機(jī)溶劑混合后逐滴滴加至步驟3中下層沉淀中，攪拌并升溫至50-58℃，攪拌10-20h后，減壓蒸餾/減壓干燥得到高濃度溶酶菌-殼聚糖-硅油復(fù)合物質(zhì)；

步驟5：多次洗滌后收集。

作為優(yōu)選，所述步驟3中微酸環(huán)境為偏磷酸鈉水溶液，所述步驟4中有機(jī)溶劑為DMA。

作為優(yōu)選，還包括輔助制劑A，所述輔助制劑A包括青刺果油提取物、玫瑰花油提取物、白蘭花油提取物；所述溶菌酶A試劑與輔助制劑A混合形成凈化精油。

作為優(yōu)選，還包括輔助制劑B，所述輔助制劑B包括葛根提取物、大豆異黃酮提取物、植物胎盤(pán)液；所述輔助制劑B與溶菌酶A制劑混合形成凈化精華。

作為優(yōu)選，還包括輔助制劑C，所述輔助制劑C包括蜂膠提取物、薄荷腦、尿囊素；所述輔助制劑C和溶菌酶A制劑混合形成凈化霜。

作為優(yōu)選，將所述凈化精油、凈化凈化或凈化霜均勻涂抹在身體淋巴系統(tǒng)所在位置后配合按摩手法按摩直至吸收。

制備方法

溶菌酶是采用生物工程技術(shù)進(jìn)行克隆、提取而制取,它是一種天然酶，安全綠色的添加劑，無(wú)抗藥性。

該酶廣泛存在于人體多種組織中，鳥(niǎo)類和家禽的蛋清、哺乳動(dòng)物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的單一肽鏈。它富含堿性氨基酸，有4對(duì)二硫鍵維持酶構(gòu)型，是一種堿性蛋白質(zhì)，其N端為賴氨酸，C端為亮氨酸?？煞纸馊鼙谖⑶蚓?、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽(yáng)性菌。溶菌酶在等電點(diǎn)以下較廣泛的pH值范圍內(nèi)，分子帶正電荷，可吸附于弱酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上，洗脫后鹽析，可得溶菌酶沉淀，再進(jìn)行精制可得成品。蛋清吸附↓724樹(shù)脂洗滌↓緩沖液洗脫↓硫酸銨溶液鹽析透析去堿性蛋白↓NaOH凍干溶菌酶凍干粉沉淀干燥溶菌酶在5～10℃下，將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg 724樹(shù)脂中，攪拌吸附6h，在0～5℃靜置過(guò)夜。傾出上層蛋清，樹(shù)脂離心甩干，用蒸餾水反復(fù)洗去黏附的卵蛋白，然后將樹(shù)脂裝入柱內(nèi)，用0?15mol/L、pH=6?5磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹(shù)脂，再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨，使最終含硫酸銨量為40%，有白色沉淀生成，冷處放置過(guò)夜。虹吸上層清液，沉淀吸濾抽干，再用1倍蒸餾水溶解沉淀呈稀糊狀，然后裝入透析袋，在約5℃的條件下，對(duì)蒸餾水透析24h左右，中間換水2～3次。離心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次，洗液與離心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氫氧化鈉溶液，同時(shí)不斷攪拌，使pH值上升到8?0～9?0，如有白色沉淀，即離心除去。然后用3mol/L鹽酸調(diào)pH=5?0，冷凍干燥，即得白色片狀溶菌酶。也可將離心液用3mol/L鹽酸調(diào)pH=3?5，在攪拌下緩慢加入5%的固體氯化鈉，在約5℃的溫度下靜置48h，離心，沉淀用0℃丙酮洗滌，干燥，即得溶菌酶。

作用機(jī)理

溶菌酶對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、好氣性孢子形成菌、枯草桿菌、耐輻射微球菌均有良好的分解作用,對(duì)大腸桿菌、普通變球菌和副溶血性弧菌等革蘭氏陰性菌也有一定程度的溶解作用。溶菌酶具有分解細(xì)菌細(xì)胞壁中肽聚糖的特殊作用。細(xì)菌的細(xì)胞壁由胞壁質(zhì)組成,胞壁質(zhì)是由Ｎ-乙酰氨基葡萄糖及Ｎ-乙酰胞壁酸交替組成的多聚物,胞壁酸殘基上可以連接多肽,稱為肽聚糖。多糖以直鏈形式存在,彼此鄰近的多糖鏈之間可以通過(guò)肽鏈部分相互連接,從而形成三維結(jié)構(gòu)。酶的活性中心是天門(mén)冬氨酸和谷氨酸,溶菌酶通過(guò)其肽鍵中第35位的谷氨酸和第52位的天門(mén)冬氨酸構(gòu)成的活性部位水解破壞組成微生物細(xì)胞壁肽聚糖分子的Ｎ-乙酰胞壁酸(NAM)與Ｎ-乙酰葡萄糖氨(NAG)之間的β-1,4糖苷鍵,使細(xì)胞因滲透壓不平衡引起破裂,從而導(dǎo)致菌體細(xì)胞壁溶解而起到殺死細(xì)菌(尤其是球菌)的目的。

概述

溶菌酶(LZM)，N-乙酰胞壁胺聚糖水解酶，一種水解細(xì)胞壁肽聚糖，能使一些細(xì)菌溶解的堿性蛋白酶。由129個(gè)氨基酸殘基組成，有4對(duì)鏈間雙硫鍵形成穩(wěn)定的分子構(gòu)型。含有多種氨基酸，特別是含有大量的精氨酸、賴氨酸和亮氨酸。存在于唾液、眼淚、汗液、乳汁、腸分泌物、蛋清和臟器組織液中，在吞噬細(xì)胞的溶酶體中亦大量存在。它能使革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁的肽聚糖中乙酰葡糖胺和乙酰胞壁酸之間的1，4-β-糖苷鍵斷裂，使細(xì)胞壁形成很多空洞，導(dǎo)致菌體溶解死亡。革蘭陰性菌在細(xì)胞壁肽聚糖外面有一層脂多糖和脂蛋白，因不易受溶菌酶作用。但溶菌酶能促進(jìn)和協(xié)助抗體——補(bǔ)體的溶菌作用，從而增強(qiáng)其殺菌作用。在吞噬細(xì)胞的溶酶體中含有豐富的溶菌酶，是吞噬細(xì)胞在發(fā)揮吞噬作用時(shí)的一種有力武器。此外，大多數(shù)凝固酶陽(yáng)性和若干凝固酶陰性的金黃色葡萄球菌也會(huì)產(chǎn)生一種與溶菌酶類似的胞外酶，稱作內(nèi)-β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶(EC 3.4.99.17)，它可水解肽聚糖分子中的葡糖胺酰-(1→4)-β-鍵。

優(yōu)點(diǎn)

1．溶菌酶是很穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，有較強(qiáng)的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的最耐熱的酶；

2．溶菌酶不會(huì)因?yàn)橛袡C(jī)溶劑的處理而失活，當(dāng)轉(zhuǎn)移到水溶液中時(shí)，溶菌酶的活力可全部恢復(fù)；

3．溶菌酶可被冷凍或干燥處理，且活力穩(wěn)定；

4．溶菌酶適宜pH5.3~6.4，可用于低酸性食品防腐；

5．溶菌酶生產(chǎn)成本較低；

6．溶菌酶的抗菌譜較廣，不僅局限于G- 菌，對(duì)部分G+菌也有抑制效果；

7．溶菌酶作為防腐劑安全性高。溶菌酶是一種天然蛋白質(zhì)，1992年FAO/WTO 的食品添加劑協(xié)會(huì)已經(jīng)認(rèn)定溶菌酶在食品中應(yīng)用是安全的。

副作用

偶有較輕的過(guò)敏反應(yīng)。氯化溶菌酶醫(yī)療效果更廣，有濃痰分散、出血抑制、組織修復(fù)、消炎鎮(zhèn)痛、抗過(guò)濾性病毒等作用，因而用氯化溶菌酶的制藥有消炎消痔、治感冒、皮膚病及眼、鼻、喉等用藥.

產(chǎn)品信息
[顏色]	白色
[重量]	5g
危險(xiǎn)性類別
[危險(xiǎn)性類別]	非危險(xiǎn)品