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氧化鋁活度測定法(薄層色譜法)的實驗


實驗室k / 2019-08-08

       一、目的

       (1)掌握薄層軟板的制備方法。
       (2)熟悉薄層色譜的一般操作方法。
       (3)掌握用薄層軟板測定氧化鋁活度的方法。
       二、儀器與試劑
       (1)儀器:色譜缸(25×6.5x3cm)、玻璃板(3×20cm)、毛細管(Φ0.5mm)、量筒、玻璃棒;
       (2)氧化鋁:過180目篩的細粉(如180~220目);
       (3)四氯化碳:10ml;
       (4)五色染料:稱取偶氮苯60mg,對甲氧基偶氮苯40mg,蘇丹黃、蘇丹紅、對氨基偶氮苯各20mg,置于50ml容量瓶中,加四氯化碳(經(jīng)NaOH干燥后重新蒸餾)溶解并稀釋至刻度、搖勻。
       三、實驗步驟
       1.氧化鋁軟板的制備——干法鋪板    將待測氧化鋁撒在潔凈的玻璃板(3×20cm)的一端(玻璃板下面可墊一張白紙),另取比玻璃板寬度稍大的玻璃管,在管的兩端各繞幾圈塑料絲,其距離即為薄層的寬度,其厚度即為薄層的厚度(以0.5~1mm為宜)。在塑料卷的外側(cè)可套上一小段橡皮圈作為固定邊,雙手均勻用力,推擠氧化鋁至玻璃板的另一端,使成一均勻平坦的薄層。
       2.點樣、展開    取氧化鋁薄層板一塊,距一端2.5cm處作為起始線(可用細針輕輕接觸起始線邊緣部分作為標記,但不要戳穿)。取毛細管一根,點加五色染料0.02ml于起始線中點。在色譜槽內(nèi)放入10ml四氯化碳。將點好樣的氧化鋁薄層板點樣的一端浸入展開劑中,浸沒深度約為0.5cm,傾斜角度為15~20°。待展開劑到離起始約15cm時(約需10min)取出。觀察各染料的位置和顏色,測定比移值,根據(jù)下表確定氧化鋁的活度。
氧化鋁活度的薄層定級法

                              活度級

偶氮染料                 

偶氮苯 0.59 0.74 0.85 0.95
對甲氧基偶氮苯 0.16 0.49 0.69 0.89
蘇丹黃 0.01 0.25 0.57 0.78
蘇丹紅 0.00 0.10 0.33 0.56
對氨基偶氮苯 0.00 0.03 0.08 0.19
       四、注意事項
       (1)鋪板時,用力要均勻,推移不宜過快,也不能中途停頓或來回反復(fù),否則厚薄不均勻。
       (2)軟板薄層硫松,很不牢固,稍受震動或經(jīng)風(fēng)吹就會把薄層破壞,因此在點樣、展開、顯色等操作中都要特別小心。
       (3)點樣要輕,盡量避免出坑;操作越快越好,盡量防止吸收水分。
       (4)量筒不要混用(尤其是量水用的量筒)。
       (5)氧化鋁稱量時要快,稱后蓋嚴。
       五、思考題
       1.根據(jù)蘇丹黃及蘇丹紅結(jié)構(gòu)上的差異(極性大小),試解釋用四氯化碳作展開劑時為什么蘇丹黃的Rf值大于蘇丹紅?
       2.用氧化鋁軟板分離混合物,是屬于哪一種層析原理?
       3.制備氧化鋁軟板應(yīng)該注意哪些問題?

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