氧化鋁活度測定法(薄層色譜法)的實驗
實驗室k / 2019-08-08
一、目的
(1)掌握薄層軟板的制備方法。
(2)熟悉薄層色譜的一般操作方法。
(3)掌握用薄層軟板測定氧化鋁活度的方法。
二、儀器與試劑
(1)儀器:色譜缸(25×6.5x3cm)、玻璃板(3×20cm)、毛細管(Φ0.5mm)、量筒、玻璃棒;
(2)氧化鋁:過180目篩的細粉(如180~220目);
(3)四氯化碳:10ml;
(4)五色染料:稱取偶氮苯60mg,對甲氧基偶氮苯40mg,蘇丹黃、蘇丹紅、對氨基偶氮苯各20mg,置于50ml容量瓶中,加四氯化碳(經(jīng)NaOH干燥后重新蒸餾)溶解并稀釋至刻度、搖勻。
三、實驗步驟
1.氧化鋁軟板的制備——干法鋪板 將待測氧化鋁撒在潔凈的玻璃板(3×20cm)的一端(玻璃板下面可墊一張白紙),另取比玻璃板寬度稍大的玻璃管,在管的兩端各繞幾圈塑料絲,其距離即為薄層的寬度,其厚度即為薄層的厚度(以0.5~1mm為宜)。在塑料卷的外側(cè)可套上一小段橡皮圈作為固定邊,雙手均勻用力,推擠氧化鋁至玻璃板的另一端,使成一均勻平坦的薄層。
2.點樣、展開 取氧化鋁薄層板一塊,距一端2.5cm處作為起始線(可用細針輕輕接觸起始線邊緣部分作為標記,但不要戳穿)。取毛細管一根,點加五色染料0.02ml于起始線中點。在色譜槽內(nèi)放入10ml四氯化碳。將點好樣的氧化鋁薄層板點樣的一端浸入展開劑中,浸沒深度約為0.5cm,傾斜角度為15~20°。待展開劑到離起始約15cm時(約需10min)取出。觀察各染料的位置和顏色,測定比移值,根據(jù)下表確定氧化鋁的活度。
氧化鋁活度的薄層定級法
|
活度級
偶氮染料
|
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
Ⅴ |
| 偶氮苯 |
0.59 |
0.74 |
0.85 |
0.95 |
| 對甲氧基偶氮苯 |
0.16 |
0.49 |
0.69 |
0.89 |
| 蘇丹黃 |
0.01 |
0.25 |
0.57 |
0.78 |
| 蘇丹紅 |
0.00 |
0.10 |
0.33 |
0.56 |
| 對氨基偶氮苯 |
0.00 |
0.03 |
0.08 |
0.19 |
四、注意事項
(1)鋪板時,用力要均勻,推移不宜過快,也不能中途停頓或來回反復(fù),否則厚薄不均勻。
(2)軟板薄層硫松,很不牢固,稍受震動或經(jīng)風(fēng)吹就會把薄層破壞,因此在點樣、展開、顯色等操作中都要特別小心。
(3)點樣要輕,盡量避免出坑;操作越快越好,盡量防止吸收水分。
(4)量筒不要混用(尤其是量水用的量筒)。
(5)氧化鋁稱量時要快,稱后蓋嚴。
五、思考題
1.根據(jù)蘇丹黃及蘇丹紅結(jié)構(gòu)上的差異(極性大小),試解釋用四氯化碳作展開劑時為什么蘇丹黃的Rf值大于蘇丹紅?
2.用氧化鋁軟板分離混合物,是屬于哪一種層析原理?
3.制備氧化鋁軟板應(yīng)該注意哪些問題?