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 福林酚

中文名稱：福林酚

英文名稱：Folin reagent 

別稱：福林試劑

CAS號：R001

規(guī)格    100ML

 

化學特性

福林酚是多種化合物配制成的混合物，一種能與酚羥基呈色的磷鉬酸-磷鎢酸試劑。可與蛋白質分子中酪氨酸殘基作用生成深藍色化合物。在勞里法蛋白質定量中也使用該試劑。無色至淡黃色液體,試劑中的 W6+ 在堿性條件下，與體系中存在的酚羥基發(fā)生反應，得到呈現(xiàn)藍色的W5+。

福林酚(Lowry)法系依據(jù)蛋白質分子中含有的肽鍵在堿性溶液中與Cu2+螯合形成蛋白質-銅復合物,此復合物使酚試劑的磷鉬酸還原,產(chǎn)生藍色化合物,同時在堿性條件下酚試劑易被蛋白質中的酪氨酸、酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸還原呈藍色反應。在一定范圍內其顏色深淺與蛋白質濃度呈正比,以蛋白質對照品溶液作標準曲線,采用比色法測定供試品中蛋白質的含量。該法靈敏度高,測定范圍通?？蛇_20~250μg。其中福林試劑是該檢測方法中最關鍵的試劑。福林試劑的制備在中國藥典2015年版四部中有收載,目前也有市售產(chǎn)品。實驗室自制福林試劑步驟繁瑣,過程復雜,制備所得的試劑質量無法保證。而福林試劑的其中福林試劑是該檢測方法中最關鍵的試劑。而福林試劑的市售品較容易獲得。

蛋白質或多肽分子中有帶酚基酪氨酸或色氨酸，在堿性條件下，可使酚試劑中的磷鉬酸化合物還原成藍色（生成鉬藍和鎢藍化合物）。藍色的深淺與蛋白質的含量成正比， 可用比色法測定。

蛋白酶活力測定一般采用酪蛋白(干酪素,酪素)為底物,在一定的水解條件下生成氨基酸,其活力用生成酪氨酸的量表示,而酪氨酸量采用福林—酚試劑法測定.福林—酚試劑系磷鉬酸鹽與磷鎢酸鹽的雜多酸溶液,在堿性條件下易被酪氨酸中酚基還原,生成鉬蘭與鎢蘭,用比色法測定. 本文對酶的浸取,水解條件及比色條件進行了試驗,目的是進一步了解蛋白酶活力測定中影響因素,使方法的重復性更好,準確度更高.

產(chǎn)品用途

福林酚用作化驗分析,蛋白質含量的測定,蛋白質分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)與福林酚反應，生成深藍色復合物，藍色的深淺與蛋白質含量成正比。適用于對體系中存在酚羥基化合物其含量的比色法、分光光度法。

測定方法

將1ml標準蛋白溶液和5ml0.025mol/lPH7.5的磷酸緩沖液加入試管中，在40℃保溫10min，迅速加入1ml酶液，保溫15min后加入3ml10%的三氯乙酸中止反應。取濾液1ml加入0.55M的碳酸鈉溶液5ml和福林試劑0.5ml，40℃水浴10min顯色，在OD680處比色。

生產(chǎn)方法

向2000mL的磨口回流瓶中加入100g鎢酸鈉(Na2WO2·2H2O)、25g鉬酸鈉及700mL的去離子水，再加入50mL85%的磷酸及濃鹽酸l00mL，充分混合后，接上回流冷凝管，以小火回流10h，結束后再加入50g的硫酸鋰(Li2S

O4)、50mL去離子水及數(shù)滴液溴，再繼續(xù)沸騰15min，以驅除過量的溴，冷卻后濾液呈黃綠色(如仍呈綠色，需再重復滴加溴水的步驟)，加去離子水定容至1000mL，過濾，濾液置于棕色試劑瓶中，貯于冰箱中可長期保存?zhèn)溆?。此溶液使用時可按1:3比例用去離子水稀釋。

 

產(chǎn)品信息
[顏色]	無色液體
[重量]	500ml
危險性類別
[危險性類別]	非危險品