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能量轉(zhuǎn)移研究方法和熒光共振能量轉(zhuǎn)移在生物學(xué)上的應(yīng)用

化學(xué)先生 / 2019-08-29

1.能量轉(zhuǎn)移研究方法

能量轉(zhuǎn)移的實(shí)驗研究方法有穩(wěn)態(tài)光譜法(常用的有吸收光譜、熒光發(fā)射和偏振光請、線二色及圓二色譜等)和時間分辨光譜法(瞬態(tài)吸收和時間分辨熒光光譜)。能量轉(zhuǎn)移的理論研究方法包括確定型方法、隨機(jī)型方法。

2.熒光共振能量轉(zhuǎn)移在生物學(xué)上的應(yīng)用

熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET) (Fluorescence/ Forster resonance energy transfer) 是比較分子間距離與分子直徑的有效工具，廣泛用于研究各種涉及分子間距離變化的生物現(xiàn)象，測量前先將給體分子和受體分子標(biāo)記到蛋白質(zhì)，這樣可以通過測量給體分子和受體分子能量傳遞效率的變化來定量測定兩個發(fā)光基團(tuán)之間的距離。FRET 在蛋白質(zhì)空間構(gòu)象、蛋白與蛋白間相互作用、核酸與蛋白間相互作用以及其他一些方面的研究中得到廣泛應(yīng)用。FRET的應(yīng)用:

①可用于研究蛋白質(zhì)以及蛋白復(fù)合體的結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)象與布局。

②研究蛋白質(zhì)的折疊，蛋白質(zhì)折疊是一個非常繁雜的過程，因為它涉及到通過大量途徑來將無數(shù)去折疊構(gòu)象連接成為唯一的天然構(gòu)象。在用實(shí)驗方法來探索各個途徑所占比例的漫長過程中，F(xiàn)RET已經(jīng)能夠測量自由狀態(tài)下單分子蛋白折疊的表面自由能特征，這些數(shù)據(jù)用其他方法是難以得到的。

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