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吸收光譜的定性分析方法


實驗室k / 2019-07-15

       在可見光區(qū)和紫外線區(qū)以吸收光譜做定性或定量時，主要根據(jù)不同物質(zhì)在光譜上具有一些特征性吸收來進行測定的。這些特征有最大吸收波長、肩峰、吸光系數(shù)和吸收度比值等，這些數(shù)據(jù)被稱為某物質(zhì)的特征性(物理)常數(shù)。測定樣品所得的特征性常數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)品的特征性常數(shù)值進行嚴(yán)格對照，根據(jù)二者的一致性，可做為初步定性分析。要測得這些數(shù)據(jù)需要較精密準(zhǔn)確的儀器。從儀器的精度及其所適應(yīng)吸收光譜的波長范圍等方面來看，581-G型光電比色計、72型及721型分光光度計均不適于對物質(zhì)做定性分折用。751型分光光度計使用波長范圍廣、精度高，可以用來對物質(zhì)進行定性分析測定。特別是利用751分光光度計對物質(zhì)的最大吸收波長λ最大和吸光系數(shù)ελ及E1cm1%·λ等特征常數(shù)的測定，常做為定性分析的依據(jù)。

       分析方法如下：
       1.對照光譜曲線的一致性進行初步定性分析    如果樣品與標(biāo)準(zhǔn)品是同一種化合物的話，它們的吸收光譜曲線也必然完全一致。使被測樣品與標(biāo)準(zhǔn)品兩溶液在條件完全相同條件下，分別測定它們的吸收光譜曲線，比較對照二者是否一致。如無標(biāo)準(zhǔn)品時，可參考標(biāo)準(zhǔn)圖譜，并與之比較，二者吸收光譜曲線一致時，可初步定性是同一物質(zhì)。吸收光譜曲線的做法是以波長為橫坐標(biāo)，以吸收度A或吸光系數(shù)ελ或lgελ為縱坐標(biāo)作圖。如以資料中的光譜曲線做標(biāo)準(zhǔn)對照時，樣品液也必須按照標(biāo)準(zhǔn)圖譜條件規(guī)定的要求去做，測得結(jié)果再與標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照定性。
       例如，根據(jù)測定，繪制合成維生素A2(實線)與天然維生素A2(虛線)的紫外吸收光譜曲線圖(圖13-20)。它們所用溶劑與所配濃度都相同，二者的紫外吸收光譜圖完全一致，說明合成的維生素A2和天然品是相當(dāng)?shù)摹?/span>

       為了進一步確證，有時可改換一種溶劑，分別再測定吸收光譜曲線進行比較。還可采取改換其它條件，使標(biāo)準(zhǔn)品與樣品在新條件下進行測定并繪圖比較，如果二者光譜圖仍相一致，即可做進一步定性確證。
       2.對照比較“吸收度比值或吸光系數(shù)比值”進行定性分析    有的物質(zhì)其光譜中吸收峰較多，可以將幾個吸收峰處的吸收度A的比值或吸光系數(shù)的比值做為定性依據(jù)。因?qū)υ撐镔|(zhì)來說，其各自峰值的最大吸收波長λ最大是一定的，那么它們的吸收度比值或吸光系數(shù)的比值也必然是一定的，并為其特征性之一。例如維生素B12的吸收光譜圖上有三個吸收峰，分別是278、361及550nm，它們的吸光系數(shù)E1cm1%λ或吸收度A的比值為：

       如某被鑒定樣品，測得吸收峰的數(shù)目和峰值波長與以上278、361及550nm近似，且它們的吸光系數(shù)比值(或吸收度A的比值)都在所定的范圍之內(nèi)，則可考慮樣品結(jié)構(gòu)基本與標(biāo)準(zhǔn)維生素B12相同。

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