失去氨的試驗法
胍在干熱之下產(chǎn)生雙胍和氨:
含有上列基團的胍鹽或其衍生物的鹽,在加熱至約250°時,也會同樣地熱解分裂出氨。雙胍或胍的環(huán)狀衍生物加熱時是不會分裂出氨的。含有自由NH2基團的胍鹽失去了氨,將與反應(yīng)(1)相似,都是涉及縮合作用的:
式(2)中放出的氨,在氣相中可用奈斯勒氏試劑進行檢定。
從這些化合物的水溶鹽酸鹽中分裂出氨,是有選擇性的。伯、仲、叔胺類的鹽加熱到250°時,不會有氨放出。氨基酸的鹽類,除了屬于胍衍生物的精氨酸鹽外,都有同樣情況。胍基醋酸和甲替胍基醋酸加熱時不產(chǎn)生氨,因它們會失水而形成內(nèi)酰胺;醋酸內(nèi)酰胍和肌酸酐系胍的環(huán)狀衍生物,沒有可以縮合的自由NH2-基,其情況也是一樣。
遇到含有自由NH2-基的脲、硫脲、縮二脲及其它脲衍生物存在時,即不能應(yīng)用這個試驗,因這些化合物加熱到250°時也會產(chǎn)生氨。
操作手續(xù) 在微量試管中,放入固體試樣少許或用其鹽酸溶液一滴在管中蒸發(fā)。再在甘油浴180°中加熱約10分鐘,以除去全部的水份。管口差以曾用一滴奈斯勒氏試劑潤濕過的濾紙一小片,然后仍在甘油浴中將試管的溫度升至250°。立刻或數(shù)分鐘內(nèi),如有棕色或黃色斑點出現(xiàn),即顯示有氨放出。
這個操作手續(xù)可檢出:
2微克 碳酸胍(鹽酸鹽) | 5微克 精氨酸鹽酸鹽 |
5微克 鹽酸硝基胍 | 100微克 鏈霉素硫酸鹽 |
1微克 脒基脲 | 0.3微克 雙氰胺 |
鏈霉素、鏈霉定(鏈霉胍)、合成靈(癸撐二胍化鹽酸),也會給出正反應(yīng)。值得注意的是,干燥的胍及其一些衍生物加熱時會分裂出(CN)2。
用雙乙酰的試驗法
許多含HN=CくNH2/Nく基團的胍基化合物如和雙乙酰及堿金屬氫氧化物或石灰溫熱時,會產(chǎn)生橙色。這個顯色反應(yīng)是母體胍所不能發(fā)生的?;钚缘奈镔|(zhì)不是雙乙酰的本身,而是由堿的作用所產(chǎn)生一個不穩(wěn)定的醛醇。也許是由于這個產(chǎn)物和各別胍基化合物的自由-NH2基的縮合。這一假設(shè)得到了肌酸(Ⅰ)和肌酸酐(Ⅱ)性行的支持:
僅式(Ⅰ)含有一個自由-NH2基,在和雙乙酰與苛性堿溫熱時產(chǎn)生紅-橙色,而內(nèi)酰胺(Ⅱ)就不如此。
胍基化合物中-NH2基的反應(yīng)活性取決于分子的其余部分。甲胍、硝基胍與氨基胍和雙乙酰及堿金屬氫氧化物溫熱,都不產(chǎn)生紅色①。這個顯色反應(yīng)雖不是一切胍基化合物都會發(fā)生,但胍基衍生物檢驗中的正反應(yīng),卻具有高度的特征價値。
操作手續(xù) 在微量試管中,放入0.1%雙乙酰水溶液一滴,接著放入試液一滴,然后再加入氧化鈣一小撮(刮勺尖大?。?。試管浸入沸水浴中。如有胍基衍生物存在,石灰會先染上紅色,然后整個溶液都發(fā)展成這色。
這個操作手續(xù)可檢出:
下列各物給出正反應(yīng):鏈霉素、對-氯苯胺雙胍、脒基硫脲、苯替雙胍。
下列各物觀察不到反應(yīng):磺胺胍、均二苯胍(蜜苯胺)蜜胺(2,4,6-三氨基-1,3,5-三嗪)、鹽酸鳥嘌呤、肌酸酐、苯??s胍胺、乙??s胍胺(2,4-二氨基-6-甲基-1,3,5-三嗪)、胍鹽類。
① 反應(yīng)性的缺乏,顯然可以得到一個事實證明,即活性醛醇轉(zhuǎn)變成不活潑二甲基苯醌的速度,遠超過于醛醇和這些胍基化合物中-NH2基的縮合速度。